한국생물공학회:학술대회논문집
- 한국생물공학회 2001년도 추계학술발표대회
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- Pages.666-670
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- 2001
유전자 재조합 E. coli를 이용한 levofloxacin의 광학선택적 생산
- 민병혁 (인하대학교 생물공학과 세포배양공학실험실) ;
- 이상윤 (인하대학교 생물공학과 세포배양공학실험실) ;
- 조종문 (인하대학교 생물공학과 세포배양공학실험실) ;
- 오선영 ((주)보령제약 중앙연구소) ;
- 장성재 ((주)보령제약 중앙연구소) ;
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임상민
((주)보령제약 중앙연구소) ;
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김동일
(인하대학교 생물공학과 세포배양공학실험실)
- Min, Byeong-Hyeok ;
- Lee, Sang-Yun ;
- Jo, Jong-Mun ;
- O, Seon-Yeong ;
- Jang, Seong-Jae ;
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Im, Sang-Min
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Kim, Dong-Il
- 발행 : 2001.11.07
초록
Levofloxacin은 ofloxacin의 L형의 광학이성질체로 D형의 ofloxacin보다 뛰어난 향균활성을 갖는다. 본 연구에서는 광학선택성을 지닌 외래 효소를 재조합균주에서 발현시키고 고농도배양과 세포고정화를 통해 levofloxacin을 생산하였다. E. coli 고농도 배양을 수행하여 89 g/L의 세포농도를 얻었으며 IPTG 1 mM로 단백질 발현을 유도하여 levofloxacin 생산 반응에 사용할 때 최적 첨가시기를 결정하였다. 세포고정화를 위해서는 sodium alginate를 사용하였으며 1.5% 첨가시 가장 우수한 효소활성을 나타내었고 재사용시에도 효소활성과 광학선택성이 유지됨올 확인하였다.
Levofloxacin is L-form stereoisomer of ofloxacin. It has better antibacterial activity than D-oflxacin. In this study, levofloxacin was produced enantioselectively by using high density culture of recombinant E. coli containing a foreign esterase gene. Final cell concentration was 89 g/L at the end of fed-batch culture and the cells were used for levofloxacin production after IPTG induction at the optimized condition. For the immobilization of recombinant E. coli. 1.5% sodium alginate showed the best result to maintain enzyme activity and enantioselectivity.
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