재조합 Escherichia coli 시스템을 이용한 폐흡충 cystein proteinase의 생산 연구

  • 홍성희 (군산대학교 공과대학 화학공학과) ;
  • 이길환 (군산대학교 공과대학 화학공학과) ;
  • 전희진 (원광대학교 의과대학 기생충학 교실) ;
  • 황현아 (원광대학교 의과대학 기생충학 교실) ;
  • 박성렬 (원광대학교 의과대학 기생충학 교실) ;
  • 황영보 (군산대학교 공과대학 화학공학과) ;
  • 박현 (원광대학교 의과대학 기생충학 교실)
  • Published : 2000.11.09

Abstract

A fermentation study of the recombinant Escherichia coli system has been tired to overproduce a recombinant Paragonimus westermani cysteine proteinase, rPwCP1. Using the modified LB media, main cultures and chemical induction with IPTG were carried out to examine the possibility of secretory protein overproduction at high cell density culture. As a result, the target protein of rPwCP1, purified by metal affinity chromatography and gel filtration, has been shown at 50.8 kDa on SDS-PAGE, and its final concentration turns out to be 350mg/L.

본 연구에서는 재조합 E. coli 시스템에 의한 재조합 cystein proteinase의 대량 생산을 위하여 4L 회분 배양 및 최적 지수 생장기에서의 IPTG- induction을 연속적으로 실시하였다. 발현된 rPwCP1 양은 진탕 배양 시스템에서의 결과와 비교해 볼때 현저하게 향상되었음을 알 수 있었으며, 더불어 metal affinity chromatography 방법으로 처리하여 전기영동을 수행한 결과, 목적 재조합 단백질만을 정제 및 농축시킬 수 있음이 확인되었다.

Keywords